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发布时间:2024-03-19 人气:106
铸源凝胶详细使用方法
材料:
铸源凝胶试剂盒(包含 A、B 两个组分)
转移膜
蛋白质样品
聚丙烯酰胺凝胶电泳仪
电泳槽
电极
步骤:
1. 配制凝胶溶液
按照试剂盒说明称取 A、B 组分。
将组分 A 和 B 按比例混合。
彻底混匀,避免产生气泡。
2. 浇铸凝胶
在凝胶电泳仪电泳槽中安装好电极。
将配制好的凝胶溶液倒入电泳槽中。
使用梳状条形成凝胶孔。
让凝胶聚合约 1 小时,或直至凝胶变硬。
3. 转移样品
将转移膜预先浸泡在转移缓冲液中。
取出转移膜,将凝胶放置在转移膜上方。
将样品加载到凝胶孔中。
4. 电泳
将电极连接到电泳仪上。
按照样品的分子量和所需的分离度设置电泳参数。
进行电泳,直至样品达到所需的迁移距离。
5. 染色和成像
电泳结束后,将凝胶放入染色液中染色。
常见的染色液包括考马斯亮蓝、银染或荧光染料。
染色完成后,使用成像系统对凝胶进行成像。
注意事项:
始终使用手套和安全眼镜进行操作。
按照试剂盒说明使用正确的试剂和缓冲液。
避免产生气泡,因为这会影响凝胶的性能。
确保凝胶完全聚合后再进行电泳。
根据样品的性质选择合适的染色方法。
凝胶电泳时使用冰块冷却电泳槽,以防止凝胶过热。
通常在使用铸源抑菌凝胶后,会在 1-3 天内排出一些东西,这取决于个人情况。
这些排出物通常包括:
组织液(黄色或血性液体)
坏死组织(腐烂的组织)
脓液(黄绿色或白色的液体)
铸源凝胶详细使用方法视频
视频步骤:
1. 准备材料:
铸源凝胶
称量仪
搅拌棒
培养皿
吹风机(可选)
2. 配制凝胶溶液:
根据说明书称取所需的铸源凝胶粉末。
加入适量蒸馏水,通常为粉末重量的10倍。
搅拌均匀,直至形成无颗粒的溶液。
3. 添加聚合剂:
根据说明书,加入适量的聚合剂(TEMED)。
再次搅拌均匀。
4. 倒入培养皿:
将混合的凝胶溶液倒入培养皿中。
使用吹风机(可选)去除表面气泡。
5. 插入梳子:
在凝胶溶液中插入梳子,形成小孔。
小孔数量取决于所要分离的样品数。
6. 凝固:
在室温下放置凝胶溶液,直至凝固(通常需要30-60分钟)。
7. 移除梳子:
当凝胶完全凝固后,轻轻移除梳子,形成小孔。
8. 样品上样:
将样品加载到小孔中。
可以使用移液器或微量吸管。
9. 电泳:
将凝胶放入电泳仪中。
运行电泳,根据样品的类型和大小设定电压和时间。
10. 定影:
电泳完成后,将凝胶转移到定影液中。
定影液会固定样品,以便后续分析和检测。
提示:
准确称取铸源凝胶粉末和蒸馏水非常重要。
彻底搅拌溶液,以确保均匀凝固。
避免在凝胶溶液中引入气泡。
实验完成后,正确处理废弃凝胶和溶液。
铸源凝胶详细使用方法图片
准备材料:
铸源凝胶
模具
天平
搅拌棒
刮刀
手套
步骤:
1. 配制凝胶
根据凝胶固化剂的质量比,称取适当的凝胶基料和固化剂。
将固化剂加入凝胶基料中,充分搅拌均匀,直至形成无气泡的混合液。
2. 混合均匀
使用搅拌棒充分搅拌混合液,确保凝胶完全均匀混合。
注意搅拌时间,避免过度搅拌导致凝胶产生气泡。
3. 倒入模具
将混合好的凝胶缓慢倒入准备好的模具中。
轻轻拍打模具,去除气泡。
4. 脱模
根据凝胶的固化时间,等待凝胶完全固化。
戴上手套,小心地从模具中取出固化的凝胶。
图解步骤:
[Image of casting gel preparation]
[Image of gel pouring into mold]
[Image of gel curing]
[Image of gel demolding]